摘要: 目的　克隆抗人膀胱癌单克隆抗体轻链可变区基因 (VL) ,并构建其原核表达载体。方法　从能分泌抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞BDI- 1中提取总RNA ,通过RT -PCR扩增出VLcDNA。用HindⅢ和XhoⅠ酶切纯化的RT -PCR产物和原核表达载体pET2 8a(+) ,在T4 DNA连接酶作用下室温连接 ,重组质粒经酶切鉴定 ,阳性克隆测序并进行序列分析。结果　扩增出VLcDNA片段 ,大小约为 340bp ,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致。VL 基因序列长度为 32 4bp ,编码 10 8个氨基酸。VL 基因属于鼠免疫球蛋白κ轻链Ⅳ亚类。结论　成功克隆出抗人膀胱癌单克隆抗体轻链可变区基因 ,并成功构建其原核表达载体。