摘要: 目的克隆和构建带入骨桥蛋白(OPN)启动子区基因的载体pGL3-OPN。方法一步法提取人脐静脉内皮细胞(HUVEC)总DNA,PCR扩增OPN全长基因，克隆入T载体，测序，双酶切连人真核表达载体pGL3-vector,酶切鉴定。将构建好的pGL3-OPN瞬时转染到人乳腺癌细胞MDA-MB-435中，利用双荧光素酶报告基因检测试剂盒进行检测，通过计算两种质粒荧光素酶活性的比值来筛选药物。结果扩增出入OPN基因全长，测序结果和GenBank记载一致，成功克隆人真核表达载体。p47可一定程度激活OPN启动子活性。结论成功构建带有人OPN基因的真核表达载体pGL3-OPN。