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    李连涛, 张宝福, 李慧忠等. 荷载管家基因shRNA的双调控溶瘤腺病毒抑制肾癌细胞增值的研究[J]. 徐州医科大学学报, 2012, 32(9): 564-568.
    引用本文: 李连涛, 张宝福, 李慧忠等. 荷载管家基因shRNA的双调控溶瘤腺病毒抑制肾癌细胞增值的研究[J]. 徐州医科大学学报, 2012, 32(9): 564-568.

    荷载管家基因shRNA的双调控溶瘤腺病毒抑制肾癌细胞增值的研究

    • 摘要: 目的 研究荷载管家基因GAPDH shRNA的溶瘤腺病毒(TD-GAPDH)对人肾癌细胞OSRC增殖抑制的作用,方法 病毒TD-GAPDH ,TD55 ,ZD55-EGFP感染OSRC细胞、人肾小管上皮细胞HK-2, Western blot法检测E1A表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) ,Western blot法分别检测GAPDH的mRNA、蛋白的表达;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;MTT法检测细胞增殖;结晶紫染色法检测细胞毒作用。结果 TDGAPDH、TD55 ,ZD55-EGFP感染的OSRC细胞均表达EIA,HK-2细胞均不表达;抑制OSRC细胞GAPDH表达作用依次为TD-GAPDH > TD55 > ZD55-EGFP, TD-GAPDH,TD55,ZD55-EGFP感染OSRC细胞的凋亡率(%)依次为(48.0±3.17),(32.3±6.68)、(23.6±5.43),各组之间差异均有统计学意义(P<0.05);用10MO1TD-GAPDH ,TD55,ZD55-EGFP感染OSRC细胞,4天后存活率(%)依次为:(26. 1 ±2.98)、(47.2±3. 10)(61.2 ±2.52) ,PBS( 100),各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);病毒对OSRC细胞的毒性作用依次为TD-GAPDH >TD55 >ZD55-EGFP,结论 TD-GAPDH能在肾癌OSRC细胞复制,具有显著的抑制肾癌OSRC细胞GAPDH基因表达、诱导凋亡、杀伤肾癌细胞作用。为溶瘤腺病毒进一步荷载癌基因的shRNA奠定基础。

       

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