摘要: 目的 观察新型阳离子磷酸胆碱聚合物MPC3o-DEA能否有效地转染针对转化生长因子Bl(transfor-ming growth factor - B1,TGF -B1)的反义寡核酸(AS -ODN)进人到血管外膜成纤维细胞中及转染后对血管外膜成纤维细胞内TGF-Bl表达的影响,为MPC3o-DEA,聚合物作为药物基因治疗载体在心血管疾病中的运用莫定基础。方法 组织贴块法培养大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞;应用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察MPC30 -DEA%/TGF-BlAS-ODN(FAM标记)在细胞内的分布和定位;流式细胞仪(FCM)检测二者的细胞转染效率、荧光强度;免疫印迹实验(Western blot)检测TGF-B1细胞内表达。结果 ①原代培养的细胞呈纺锤形,多角形或者不规则形,细胞核较大,数量1-2个不等,轮廊清楚,核仁大而明显,呈椭圆形;②激光共聚焦显微镜观察到FAM标记的基因复合物多数分布在细胞核周围;③流式结果显示转染效率及荧光强度随N/P比增加而明显增大;④Westernblot结果显示随着N/P比值的增大,TGF-B1的蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论 MPC3o-DEAT能够携带TGF-β1-AS-ODN进人离体培养的大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞,并能下调TGF-Bl蛋白的表达。