Dis312敲除对胃癌细胞葡萄糖代谢的影响及其机制

摘要: 目的探讨Dis312基因敲除对胃癌细胞葡萄糖代谢的影响,并初步探讨该作用的分子机制。方法利用CRISPR/Cas 9技术敲除胃癌细胞Dis312基因,然后利用生化法检测细胞培养液乳酸含量,ELISA法检测细胞内磷酸果糖激酶(PFK)含量,蛋白质印迹法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、缺氧诱导因子-1a(HIF1a)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、丙酮酸激酶M2 (PKM2)蛋白表达水平。结果胃癌细胞Dis312基因敲除后,细胞培养液乳酸含量和细胞内PFK含量均升高;mTOR蛋白及葡萄糖代谢相关蛋白HIF-1a、GLUT-1、PKM2水平明显升高。结论胃癌细胞Dis312基因敲除后可以促进胃癌细胞的糖酵解,其作用机制可能是通过mTOR通路上调HIF-1a,GLUT-1、PKM2水平而实现。