摘要: 目的纯化大鼠小脑一氧化氮合酶并进行特性研究。方法采用改良的ＤＥ５２及２′，５′－ＡＤＰ－ａｇａｒｏｓｅ二步层析法。结果①大鼠小脑组织一氧化氮合酶（ＮＯＳ）纯化６０００倍，收率３０％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ成一条区带，分子量约为１５０ｋｕ；②纯化后的ＮＯＳ活性依赖Ｃａ２＋和ＣａＭ，其半激活浓度分别为２００ｎｍｏｌ／Ｌ和１０ｎｍｏｌ／Ｌ，并可被ＴＦＰ和ＮＯ２－Ａｒｇ抑制，其半抑制浓度分别为１０μｍｏｌ／Ｌ和０．６μｍｏｌ／Ｌ。结论ＮＯＳ经改良后的二步层析法纯化所得结果与文献报道结果符合，此方法可用于进一步的实验研究。