人白细胞介素18 cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达
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摘要: 目的获得IL-18全长cDNA序列,研究IL-18在大肠杆菌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人外周血单个核细胞中扩增出人白细胞介素(hIL-18)的cDNA,以Sanger双脱氧法测序。进而构建了含recA启动子的表达载体PMONhIL-18,并在大肠杆菌JM101中表达,制备包涵体,并用SDS-PAGE分析表达产物。结果RT-PCR扩增出约500bp片段,SDS-PAGE示一约18kD的蛋白,与预期分子量相符,表达量占菌体蛋白的20%。结论IL-18在recA启动子下获得了高效表达,IL-18位于细胞包涵体内。