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    βB2一晶体蛋白的克隆和在大肠杆菌中的高效表达和纯化

    • 摘要: 目的表达βB2-晶体蛋白,以研究其结构与功能的关系。方法用RT-PCR的方法从大鼠晶状体中获得βB2-晶体蛋白的cDNA,将cDNA克隆到表达载体pMON5743,转染E.coli菌株JM101,以萘啶酮酸诱导表达βB2-晶体蛋白,用DEAE纤维素层析纯化。结果RT-PCR扩增获得约700bp的cDNA,在E.coli中获得高效表达,βB2-晶体蛋白占细菌总蛋白的30%。DEAE纯化后获一24kD蛋白,分子量与βB2-晶体蛋白一致。结论βB2-晶体蛋白cDNA可在大肠杆菌中获高效表达,表达产物的分子量约24kD。

       

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