摘要: 构建具有野生起点的丙型肝炎病毒 RNA 依赖的 RNA 聚合酶表达载体。方法 根据疏水性分 析选定待表达的丙型肝炎病毒非结构基因5b 区大部分基因。以聚合酶链反应扩增泛素基因。逆转录－聚合酶 链反应扩增丙型肝炎病毒 RNA 依赖的 RNA 聚合酶基因。限制性酶切长度多态性分析重组克隆?并以 DNA 序列 分析方法最终确认。结果 分别获得长240个碱基对的泛素基因与长1761个碱基对的丙型肝炎病毒 RNA 依赖 的 RNA 聚合酶基因片段?并分两步克隆于表达质粒 pET26b?限制性酶切长度多态性分析与序列分析显示克隆成 功。结论 成功构建了新型表达载体 pET26－Ub 并用于构建具有野生起点的丙型肝炎病毒 RNA 依赖的 RNA 聚 合酶表达质粒