诱生性一氧化氮合酶cRNA探针的制备及敏感性检测
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摘要: 制备地高辛标记的大鼠诱生性一氧化氮合酶(iNOS)cRNA 探针。方法 首先对携带大鼠iNOS cDNA 的 PMOS Blue 质粒进行转化扩增。然后提取扩增的质粒 DNA 并用 Bam H Ⅰ内切酶酶切处理使其线性化。 以线性化的 cDNA 为模板?在T7 RNA 聚合酶的作用下?体外转录带有地高辛的 iNOS cRNA 探针。结果 该地高辛 标记的 cRNA 探针用点杂交法能检出相应 DNA 的敏感性可达0.1μg/L。结论 该 iNOS cRNA 探针可用作检测组 织细胞内 iNOS mRNA 的表达