摘要: 对 HLA－B2704的编码基因进行克隆。方法 通过酚提法获取基因组 DNA?用 EcoR Ⅰ酶切?6 g/L 琼脂糖凝胶分离目的基因片段?采用同位素末端标记的寡核苷酸探针对重组体噬斑进行转膜原位杂交?筛选 阳性克隆?并进一步克隆化?用 WizardλDNA 纯化系统试剂盒提取纯化λDNA。结果 经酚提法获取基因组 DNA 浓度为0．8g/L?D260/D280为1．75?经高盐洗脱和乙醇纯化法获取的 DNA 浓度为0．16g/L?D260/D280为1．80?构建 的λgt10重组体?体外包装后转染 C600hflA 大肠杆菌?形成无色透明的重组噬菌体噬斑。对所建文库用同位素末 端标记的寡核苷酸探针对重组体噬斑进行转膜原位杂交?筛选出3个阳性克隆。重复克隆化?用阳性噬菌体噬斑 转染 C600hflA 大肠杆菌?产生溶菌物。结论 建立了 B2704基因组文库?并克隆了 B2704DNA