摘要: 目的　克隆大鼠白细胞介素 - 10 (IL - 10 )cDNA的全长序列 ,为其分子生物学利用奠定基础。方法　无菌条件下切取大鼠的脾脏 ,收集脾细胞 ,用脂多糖 (LPS)刺激培养 4h ;离心得到一定量细胞 ,加入变性液 ,一步法提取细胞总RNA ;逆转录合成IL - 10的第 1条链 ,用自己设计的特异性上下游引物进行PCR扩增 ,得到期望相对分子质量的PCR产物 ;酶切后插入pcDNA3 载体 ,转染感受态细胞进行筛选制备 ,并行PCR、酶切鉴定和测序。结果　脾细胞经LPS刺激后IL - 10转录水平增加 ,从提取的RNA转录产物中容易扩增出期望相对分子质量的PCR产物 ,酶切和PCR鉴定证明所得IL - 10cDNA相对分子质量与基因库报告的相近 ,测序结果表明得到的IL -10cDNA序列与基因库报告的序列完全一致。结论　大鼠的IL - 10cDNA全长序列被成功克隆