摘要:
目的 探索人类心房肌细胞的分离方法及充血性心力衰渴 (CHF)患者心房肌细胞延迟整流钾电流 (IK)和内向整流钾电流 (IK1 )的特征。方法 酶法分离心肌细胞 ;全细胞膜片钳法记录电流。结果 两种酶学分离方法均能成功地分离出合格的心肌细胞。其中 ,用Ⅰ型胶原酶和蛋白酶分离出的活细胞的比例约为 4 0 %~ 5 0 % ,而且理想的细胞较多 ;而用V型胶原酶则仅能分离出 1%~ 3%的活细胞。细胞分离过程受消化酶的类型、季节、病种、心功能等多种因素的影响。以上任一因素发生变化 ,分离细胞的质和量均会发生改变。利用掌握的全细胞膜片钳技术 ,我们对人心肌细胞上的钾电流进行了探索。结果显示 ,在充血性心衰患者心房肌细胞上 ,存在着IK 和IK1 。其中 ,IK 的激活较慢 ,其电流轨迹在刺激开始后缓慢上升 ,至刺激中止前达到顶点。复极至 - 30mV时 ,可引导出IK 的尾电流。与时间依赖性电流相比 ,此电流的幅值较小。与IK 相比 ,IK1 的激活较快 ,激活后迅即趋于稳态 ,不失活。当膜电位处于不同的电位水平时 ,IK1 分别表现为内向电流和外向电流 ,并且随着膜电位的增大 ,内向电流逐渐减小 ,外向电流则越来越大。结论 人心肌细胞的分离过程受多种因素的影响。对于CHF患者而言 ,其心房肌细胞上存在着IK 和IK1 ,这两种电流