凝血酶调节蛋白N端155个氨基酸残基的原核表达
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摘要: 目的 研究凝血酶调节蛋白 (TM)N端 15 5个氨基酸残基的原核表达。方法 通过PCR特异性扩增TM编码N端 15 5个氨基酸残基的基因片段 ,将目的基因片段连接入pQE31表达载体 ,转化入大肠杆菌中 ,用IPTG诱导表达。将表达的融合蛋白鉴定及纯化。结果 N端 15 5个氨基酸残基目的蛋白在大肠杆菌中大量表达 ,总量达到全菌蛋白的 30 %以上。表达的蛋白全部以包涵体形式存在 ,经Westernblot鉴定为目的蛋白 ,可纯化和复性。结论 凝血酶调节蛋白N端 15 5个氨基酸残基目的蛋白可通过原核大量表达 ,为进一步研究其功能及制备抗体提供了条件。