银杏叶提取物和黄芪甲苷对牛晶状体醛糖还原酶的抑制作用
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摘要: 目的观察并比较银杏叶提取物(Ginkgo bilobaextract,GBE)和黄芪甲苷(Astragalus SaponinⅠ,ASⅠ)对牛晶状体提取醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性的抑制作用。方法饱和硫酸铵溶液盐析法提取牛晶状体中的AR,Tris-甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定所提取AR,Folin-酚法测定AR终提取液的蛋白浓度,DL-甘油醛-NADPH-紫外分光光度法测定牛晶状体AR活性,并以酶促动力学原理判断抑制类型并计算GBE和ASⅠ对AR的抑制常数。结果从电泳图判断所提蛋白质即为目标蛋白AR,收率为0.5%。GBE和ASⅠ对牛晶状体AR分别具有竞争性抑制和反竞争性抑制作用,其抑制常数分别为4.048μmol.L-1和6.218μmol.L-1。结论GBE和ASⅠ对牛晶状体AR的抑制类型不同,其抑制强度也有差异。