Sox9、siRNA表达载体的构建与鉴定
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摘要: 构建 Sox9siRNA表达载体,分析 Sox9在软骨肉瘤中的作用机制。方法 根据 KouI,IkegawaS 提供的 Sox9mRNA序 列,设 计 并 合 成 两 端 含 有 酶 切 位 点 的 64个 碱 基 的 寡 核 苷 酸 链。 寡 核 苷 酸 链 退 火 后 用 T4DNA连接酶连接到线性化的 pSilencer质粒 中,并 对 重 组 质 粒 (命 名 为 pSilencer/Sox9siRNA)进 行 酶 切 及 测 序 鉴定。结果 双酶切证实 Sox9siRNA表达 载 体 克 隆 构 建 成 功 ,插 入 片 段 测 序 结 果 与 合 成 的 siRNA结 果 一 致。 结论 成功构建 Sox9siRNA表达载体