基因放射性核素反义治疗肾癌的体内外实验研究
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摘要: 目的 探讨 Ｋｉ67基因放射性核 素 反 义 治 疗 对 人 肾 癌 细 胞 生 长 及 凋 亡 的 影 响。方 法 人 工 合 成 Ｋｉ67 基因反义核酸 (ＡＳＯＤＮｓ),氯胺 -Ｔ法125Ｉ标记 ＡＳＯＤＮｓ(125Ｉ-ＡＳＯＤＮｓ)。①体外实验：125Ｉ-ＡＳＯＤＮｓ(10.0μｍｏｌ/ Ｌ、2.59ＭＢｑ/Ｌ)转染人肾癌 786-0细胞,采用免疫组化、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测 Ｋｉ67表达；免疫组化 ＴＵＮＥＬ法检测细 胞凋亡。以 ＡＳＯＤＮｓ(10.0μｍｏｌ/Ｌ)为 对 照。 ② 动 物 实 验：建 立 786-0细 胞 ＢＡＬＢ/Ｃ-ｎｕ裸 鼠 模 型,125Ｉ- ＡＳＯＤＮｓ治疗组瘤体注射 0.1ｍｌ125Ｉ-ＡＳＯＤＮｓ(7.4ＭＢｑ/Ｌ、10ｎｍｏｌ),ＡＳＯＤＮｓ治疗组瘤体注射 0.1ｍｌＡＳＯＤＮｓ (10ｎｍｏｌ),连续 4天。药物处理后第 6天取瘤组织检测肿瘤体积、Ｋｉ67表达、细胞凋亡。结果 ①体外实验：125Ｉ -ＡＳＯＤＮｓ治疗组肾癌细胞 Ｋｉ67表达阳性率 [ (21.5±1.2)% ]降低,Ｋｉ67蛋白 [ (49.9±4.5)% ]降低,细胞凋亡 率 [ (28.9±1.3)% ]升高,与 ＡＳＯＤＮｓ治疗组 [ (29.9±0.4)%、(82.1±1.9)%、(15.7±0.5)% ]比 较 差 异 有 显 著性 (Ｐ<0.01)。②动物实验：125Ｉ-ＡＳＯＤＮｓ治疗组小鼠肿 瘤 体 积 (ｍｍ3 )(76.1±22.9)减 小,Ｋｉ-67表 达 率 [ (20.8±1.0)% ]下 降,Ｋｉ-67蛋 白 量 [ (58.6±2.9)% ]降 低,肿 瘤 细 胞 凋 亡 率 [ (24.9±2.0)% ]升 高,与 ＡＳＯＤＮｓ治疗组 [ (185.7±37.7)、(29.2±1)% 、(79.7±3.4)% 、(17.8±1.9)% ]比 较 差 异 有 显 著 性 (Ｐ< 0.01)。结论 Ｋｉ67基因放射性核素反义治 疗 较 单 纯 反 义 治 疗 具 有 更 强 的 阻 抑 肾 癌 细 胞 Ｋｉ67基 因 表 达、抑 制 增 殖、促进凋亡作用
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