摘要: 目的 利用分子生物学技术,构建胸苷激酶基因 (ＴＫ)自杀基因并测定其结构,为该自杀基因的进一步 研究提供良好的实验 基 础。 方 法 以 人 类 单 纯 疱 疹 病 毒 Ⅰ (ＨＳＶ1)基 因 组 ＤＮＡ为 模 板,利 用 聚 合 酶 链 反 应 (ＰＣＲ)法,扩增出约为 1100ｂｐＴＫ基因,定向克隆到载体 ＰＥＧＭ -Ｔ,构建克隆载体。两端分别引入限制性内切 酶 ＮｏｔⅠ、ＸｈｏｌⅠ酶切位点,经 ＰＣＲ及酶切鉴定初步证实 为 重 组 体 后,测 序 认 证。结 果 经 ＰＣＲ、酶 切 鉴 定 和 测 序鉴定完成 ＴＫ基因的构建,同源性高达 98.70%,完全具备表达该目的 基 因 的 要 求。结 论 成 功 扩 增 出 ＴＫ 基 因,为继续研究打下基础。