ＩＬ－27亚基基因真核表达质粒的构建与表达

摘要: 目的克隆人白细胞介素 27（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ27?ＩＬ－27）蛋白亚基ＥＢ病毒诱导的基因 3（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒｖｉ- ｒｕｓ－ｉｎｄｕｃｅｄｇｅｎｅ3?ＥＢＩ3）与ｐ28基因的ｃＤＮＡ?分别构建其真核表达质粒并在ＣＯＳ－7细胞表达。方法人外周血单核细胞诱导为成熟树突状细胞后提取细胞总ＲＮＡ?经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增ＥＢＩ3与ｐ28 基因ｃＤＮＡ?酶切后插入ｐｃＤＮＡ－3．1构建真核表达载体ｐｃＤＮＡ－ＥＢＩ3与ｐｃＤＮＡ－ｐ28。重组质粒转染ＣＯＳ－7 细胞?ＲＴ－ＰＣＲ检测目的基因表达。结果成功构建克隆人ＩＬ－27蛋白亚基真核表达质粒?重组质粒分别转染ＣＯＳ－7细胞后检测到相应基因表达。结论人ＩＬ－27蛋白亚基基因克隆及真核表达质粒的成功构建?为构建表达有生物学活性的重组人单链ＩＬ－27蛋白奠定基础