摘要:
目的 研究携带人 IL24基因的复制缺陷型腺病毒 (Ad-IL24)对膀胱癌的杀伤效应。方法 聚合酶链 反应 (PCR)鉴定 Ad-IL24?并扩增、纯化和滴度测定。Ad-IL24感染人膀胱癌 Biu87细胞系?通过结晶紫染色及 四甲基偶氮唑盐 (MTT)法检测细胞杀伤作用;Westernblot法检测腺病毒 IL24蛋白的表达情况;并进一步建立裸 鼠膀胱癌模型?应用 Ad-IL24瘤内注射体内观察抗肿瘤效果。结果 PCR鉴定说明 Ad-IL24包含目的基因且 为复制缺陷型腺病毒;Westernblot结果表明 Ad-IL24能有效介导 IL24基因在 Biu87细胞中的表达;结晶紫染色 结果表明 Ad-IL24对 Biu87细胞有明显的杀伤作用?MTT表明用 MOI=10的 Ad-IL24和 Ad-EGFP感染 Biu87 细胞?6天后存活率分别为 (47.6±2.6)%、(84.7±4.5)%?比较差异有统计学意义 (P<0.05)。成功建立膀胱 癌动物模型后?瘤内注射病毒 Ad-IL24、Ad-EGFP和 PBS后 5周?AdIL-24、Ad-EGFP和 PBS各组肿瘤大小分 别为 (420.3±49.0) mm3、(639.8±52.9) mm3和 (766.1±75.8) mm3。结论 成功获得纯化的 Ad-IL24?并进 一步证明 Ad-IL24能在体内外有效抑制膀胱癌的生长?显示出良好的抗肿瘤效果?为进一步应用于膀胱癌基因 治疗奠定基础