摘要:
目的 观察硫化氢(hydrogen sulfide, H,S)对内皮细胞凋亡的影响,并从抗氧化的角度初步探讨其作用机制。方法 以硫氢化钠( sodium hydrosulfide, NaHS)作H,S的供体,人脐静脉内皮细胞(hunan umbilical vein endollelial cells, HUVECs)经10 umol/L NaHS预孵育24 h后加入33 mmol/L葡萄糖(高糖)作用48 h,以正常对照组、高糖损伤组和10 umol/L NaHS预处理组作为对照,DAPI荧光染色观察细胞核形态的变化并检测细胞凋亡,Vestern Blot检测细胞黄嘌呤氧化酶(XOD)和超氧化物歧化酶(SOD)蛋白质的表达。结果 DAPI染色荧光显微镜观察发现,与正常对照组相比,高糖损伤组HUVECs中出现大量的核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞,NalS预处理的HUVECs中细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数明显减少,大部分组胞染色质呈弥漫均匀的低强度荧光。Western Blot结果显示,33 mmol/L葡萄糖孵育HUVECs 48 h后,与正常对组相比,SOD蛋白表达降低37. 17% ,XOD蛋白的表达增加47.06% ;10 umol /L NaHS预处理组与高糖损伤组相比,HUVECs SOD蛋白的表达增加27.52% ,XOD蛋白表达降低31.20%。结论 H,S对高糖诱导的HUVECs凋亡具有拮抗作用,并与其抑制高糖引起的细胞内SOD水平的降低、XOD升高有关。