小鼠胰岛素样生长因子-1基因体外克隆及表达的研究
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摘要: 目的探讨小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因提取、鉴定及重组质粒转染COS-7细胞表达。 方法通过RT-PCR获取小鼠骨骼肌IGF-1的cDNA,将该基因亚克隆入重组质粒p1(pcDNA3.I-Nestin-EGFP)中,构建重组质粒p2(pcDNA3.1-Nestin-EGFP-IGF-1),脂质体转染COS-7细胞,ELISA检测细胞培养基中IGF-1蛋白量。结果克隆IGF-1基因cDNA与GenBank中该基因序列一致,重组质粒转染COS-7细胞培养基中均含有IGF-1蛋白。结论IGF-1基因成功构建到重组质粒p2中,且能在COS-7细胞中过表达。