摘要: 目的探讨人外周血来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的体外分离、培养及诱导分化成有功能肝样细胞的可行性。方法静脉采集13例成人外周血，分别应用单纯密度梯度离心法及人间充质干细胞富集试剂+密度梯度离心两步法分离MSCs;将得到的MSCs经贴壁纯化扩增，以流式细胞仪检测细胞表面抗原后，经肝细胞生长因子(HGF)、成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)及抑瘤素M(OSM)诱导分化成肝样细胞；以RT-PCR、免疫荧光染色及Western blot检测所得细胞中白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)在基因及蛋白水平上的表达情况；电镜检测所得细胞的超微结构。结果外周血应用单纯密度梯度离心法无法培养得到MSCs。人间充质干细胞富集试剂+密度梯度离心两步法可分离并培养获得梭形细胞，经细胞表面抗原检测证实为MSCs;所得细胞经过纯化扩增和诱导分化后，RT-PCR、免疫荧光及Vestern blot均证实细胞在基因及蛋白水平上存在ALB和AFP的表达；电镜证实其具有类肝细胞的超微结构。结论人外周血中存在MSCs并可使用非侵袭性的人间充质干细胞富集试剂+密度梯度离心两步法方法提取分离，所得MSCs具诱导分化成有功能肝样细胞的能力，此方法能够为以后的肝组织工程研究提供种子细胞来源。