摘要: 目的构建人缺失型Midkine(tMK)的原核表达载体，以得到具有生物学活性的重组蛋白。方法从测序正确的pMD18-T-tmk Vector重组质粒上切下tmk序列，重组至pET30(a+)载体中，转化BL2I(DE3),IPTC诱导蛋白表达，Heparin Sepharose4B纯化蛋白，CCK-8检测其促NIH3T3和BGC823孤胞增殖的活性。 结果成功构建了tMK的原核表达载体，纯化得到重组tMK蛋白。该蛋白在0.03125~0.5mgL范围时能明显促进NIH3T3细胞增殖(P<0.05或P<0.01),在0.0625~2mgL范围时能期显促进BGC823细胞增殖(P<0.05)。结论获得了具有生物学活性的重组tMK蛋白。