利用siRNA抑制NF-kB p65蛋白表达对EOMA细胞中TF表达影响
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摘要: 目的探讨针对小鼠EOMA细胞核因子KB(NF-KB)的小干扰RNA(siRNA)对细胞中组织因子(TF)表达的抑制作用。方法设计并化学合成针对小鼠NF-KBp65的sRNA,按照实验分组分别转染小鼠EOMA细胞,转染24h后,在相应细胞中加入肿瘤坏死因子α(TN-α,终浓度为20mgL),于此后6h分别提取各组细胞总蛋白及RNA,检测细胞内NF-KBp65蛋白表达和TF的mRNA水平。结果TNF-a刺激6h后,与空白对照组相比,阴性对照组、scramble siRNA组细胞内NF-KBp65蛋白表达和TF mRNA水平增加,而siRNA组则明显受到抑制;TNF组、TNF+scramble siRNA组细胞内NF-KBp65蛋白表达和TF mRNA水平明显增加,TNF+siRNA:组细胞内NF-KBp65蛋白表达和TF mRNA水平较空白对照组有所增加,但明显低于TNF组、TNF+scramble siRNA组(P<0.OI)。结论利用siRNA抑制NF-KBp65蛋白表达可以有效地抑制NF-KB下游靶基因TF的表达。