摘要: 目的 检测腺病毒Ad-C250表达的G250全长人源性抗体的生物学活性及其对肾癌细胞的影响。方法扩增纯化腺病毒Ad-C250，Ad-EGFP（对照病证）。病毒感染L0-2细胞，ELISA法检测细胞培养液中抗体的表达量。收集病毒感染后的细胞上清液进行纯化，Western blotting检测纯化抗体的相对分子质量及其与细胞表面G250抗原的结合能力。免疫组化法检测Ad-C250表达的抗体是否具有生物学活性.CCK-8法检测Ad-C250对肾癌Ketr-3及ACHN细胞增殖的影响。Annexin V-PE/7-AAD法检测Ad-C250对肾痛Kelr-3及ACHN细胞凋亡的影响。结果 病毒Ad-C250感染LO-2细胞后G250抗体的表达量随着感染天数的增加而增加。Western bloting实验显示Ad-G250能够表达G250抗体的轻链和重链，电泳图上该抗体能使G250抗原阳性的Kelr-3和786-0细胞在相对分子质量58 x10，附近出现反应条带，而C250抗原阴性的ACHN和HK-2细胞在相应位置无反应条带。细胞免疫组化实验显示Ketr-3细胞膜被染成棕黄色，而ACHIN细胞未见着色。CCK-8实验结果显示，Ad-C250对Ketr-3细胞有抑制作用，而对ACHN细胞的抑制作用不明显：Ad-G250扣制 Ketr-3细胞增殖存在浓度及时间依赖性。凋亡实验显示，Ad-C250诱导Ketr-3细胞温r作田和ACHN细胞相比差异具有统计学意义，Ad-C250诱导Kert-3凋亡作用和Ad-EGFP相比，是有统计学意义。结论胜病毒Ad-C250成功表达出具有生物学活性的人源性C250抗体，且Ad-C250可抑制表达G250抗原的肾癌细胞增殖，诱导其凋亡。