摘要:
目的 观察白蔡三醇对正常状态下人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化内皮型一氧化氣合酶(p-eNOS)及一氧化氯(NO)表达的调节作用,探讨白蔡三醇对HUVECs增殖的影响及可能机制。方法 实验分组:DMEM高糖(<4.5 mg/L)培养基培养组(正常组)、白蔡三醇组(分为0.2,1,5、10、20 umol/L5个剂量亚组)、白蒙三醇+LY294002组、LY294002组(阻断剂组)。其中LY294002 为磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 - kinase, PI3 - K)抑制剂。应用CCK-8法检测细胞增殖情况;Western blot检测各组细胞内蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、内皮型一氧化氣合酶(eNOS)、peNOS蛋白的表达;硝酸还原酶法检测细胞培养液中NO的浓度。结果 ①白蔡三醇组1、5umol/L2个剂量亚组与正常组相比细胞增殖增加(P<0.01),5 umol/L亚组与0.2,10,20 pmol/L亚组相比细胞增殖增加(P<0.01);白蔡三醇20 pmol/L对细胞增殖有抑制作用(P<0.01)。②与对照组比较,白蔡三醇组p-Akt(P<0.01)、pNOS(P<0.05)蛋白表达增加;与白蔡三醇组比较,白蔡三醇+ LY294002组p-Akt、p-eNOS蛋白表达降低(P<0.01)。③与对照组比较,白蔡三醇组NO表达增加(P<0.05);与白蔡三醇组比较,白蔡三醇+LY294002组NO表达降低(P<0.01)。结论 白蒙三醇可能通过PI3-K/Akt/eNOS信号通路诱导正常状态下内皮细胞NO表达的增加,从而促进内皮细胞增殖。