摘要: 目的 构建Bip蛋白真核表达重组体用于缺血性脑损伤机制的研究。方法 用RT-PCR方法获得Bip的cDNA;与TOPO载体连结,连接产物转化大肠杆菌DH5a进行筛选、序列测定;Bip cDNA片段亚克隆到真核表达载体pTRUF11-GFP;重组体pTRUF11-GFP - Bip转到293H细胞,Westerm blot鉴定Bip的表达。结果①经RT-PCR法得到了Bip的双链cDNA;②Bip测序图谱与GeneBank报道完全一致;③酶切鉴定能观察到Bip和 pTRUF11-GFP两条带; ④Western blot检测 pTRUF11 -GFP - Bip能表达Bip蛋白。结论 获得了能真核表达Bip蛋白的重组体。