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    壳聚糖介导RNA干扰沉默CXCR4基因对食管癌组胞增殖、侵袭力的影响

    • 摘要: 目的 探讨沉默CXCR4基因对食管鳞癌EC109细胞体外增殖、侵袭能力的影响。方法 化学合成两对针对CXCR4基因的干扰序列(实验序列、对照序列),构建表达小发夹RNA(shRNA)的质粒,以壳浆糖为基因载体转染人食管癌EC109细胞。荧光显微镜观测转染效率,Westemn blot法分析转染前后CXCR4蛋白的变化,集落形成实验检测细胞增殖能力,transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力,ELISA法检测转染前后EC109细胞上清液血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平的变化。结果 酶切电泳、测序证实成功构建靶向CXCR4基因的shRNA表达质粒。以壳聚糖为载体转染HEK293A,转染效率达80%以上。与空白对照组、实验对照组比较:转染实验组质粒能明显下调CXCR4蛋白表达;抑制EC109细胞增殖,影响其集落形成能力;降低EC109细胞穿膜数目,影响其侵袭能力;时间依赖性降低EC109细胞上清液中VEGF水平,转染48h及72 h后与空自对照组、实验对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CXCR4基因在食管癌细胞生长、侵袭方面发挥重要作用,沉默其表达可降低食管癌细胞增殖,抑制肿瘤细胞集落形成和侵袭能力,抑制细胞分泌VEGF能力。CXCR4基因有可能成为食管癌治疗新的、有效靶点。

       

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