摘要:
目的 探讨Fisetin阻断c-Fos/NFATel信号通路对钛颗粒诱导小鼠巨噬组胞向破骨细胞分化的影响。方法 体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,根据处理条件不同分为5组:A组(空白对照组)、B组(缺颗粒对照组)、C组(1.25 pno//L Fisetin +钛颗粒)、D组(2.5 umol/L Fiselin +钛颗粒)、E组(5 umol/L Fisetin +钛颗粒)。采用CCK-8法检测各组RAW264.7细胞增殖活性。培养6天后,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测各组细胞破骨细胞(细胞核>3)数目,免疫印迹法检测各组细胞中c-Fos/NFATal蛋白表达,RT-PCR法检测-Fos/NFATe1的基因表达。结果 CCK-8法检测结果显示各组RAW264.7细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05), TRAP染色结果显示各组细胞均有TRAP阳性多核细胞生成,B组TRAP阳性多核细胞数目最高,CD,E组呈现逐渐减少趋势,A组最少。RT-PCR和Western blot检测表明,B组c-Fos/NFATel表达最高,C、D,E组表达逐渐减少,与B组比较差异具有统计学意义(P<0.05),结论 Fisetin可通过c-Fos/NFATcI信号通路抑制钛颗粒作用下小鼠巨噬细胞向破骨细胞的分化,其抑制程度与Fisetin药物浓度有关。