摘要: 目的 构建携带脑源性神经营养因子(BDNF)基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体,并检测其体外表达目的基因的能力。方法 利用基因重组技术,采用BamHI和EcoRI双静分别将peDNA3中的BDNF目的基因片断切出,再克隆到质粒pAAV-MCS中, PCR酶切测序鉴定序列。与腺相关病-包装质粒pAAV-RC,pHelper,用磷酸钙法共转染HEK 293细胞,包装得到含转基因过表达BDNF的病毒载体(rAAV-BDNF),rAAV感染体外培养的小鼠螺旋神经节细胞(SGC)后,IRT-PCR和Western blol法检测细胞BDNP基因及蛋自表达情况。结果 成功地构建BDNF基因的rAAV载休,并可在SGC中表达BDNF,结论 SGC能稳定、高效表达外源BDNF为将其进一步应用于感音神经性耳登性疾病治疗的研究奠定了方法学基础。