PSA启动子调控并荷载hTERT-siRNAs的条件增殖型腺病毒的构建及生物学活性
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摘要: 目的 构建前列腺特异抗原(PSA)启动子调控并荷载hTERT-siRNAs的条件增殖型腺病毒,研究其对前列腺癌的特异性抗肿瘤作用。方法 EcoRV和Xba 1分别酶切pZD55-hTERT-shRNA和pZXC2-PSAEIA,将目的片段连接重组,获得质粒pPSA-ZD55-hTERT,将其与质粒pBHGE3共转染293细胞。PCR鉴定正确者即为条件增殖型腺病毒PSA -ZD55-hTERT,结品紫染色观察其对前列腺癌细胞毒性.RT-PCR,Westerblot检测前列腺癌细胞中hTERT基因沉默效果。Western blot检测EIA在前列腺癌细胞中的表达。结果 成功构建PSA启动子调控并荷载hTERT-siRNAs的条件增殖型腺病毒PSA-ZD55-hTERT,初步证实PSA-ZD55ITERT复制具有前列腺癌靶向性和特异的hTERT沉默效果。结论 成功构建条件增殖型腺病毒PSA-ZD55ITERT,为进一步体内外研究其对前列腺癌的治疗作用奠定基础。