特异性的shRNA抒制c-Jun蛋白表达对HepG2组胞增殖和迁移的影响
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摘要: 目的 构建c-Jun特异性的shRNA及研究其抑制c-Jun蛋白表达对人类肝癌细胞HepG2增殖和迁移的影响。方法 根据c-Jun编码序列设计并构建shRNA质粒,利用LipofectamineT" 2000转染HepG2细胞,荧光显微镜观察转染效率。Western blot检测其对c-Jun蛋白表达的影响。CCK-8增殖实验、平板克隆形成实验观察HepG2细胞的增殖情况, transwell和划痕愈合实验方法观察细胞的迁移情况。结果构建了c-Jun小干扰质粒slRNA-1和shRNA-2,荧光显微镜观察到shRNA质粒在HepG2细胞转染效率约在80%, Western blo显示shRNA-2小干扰质粒对c-Jun抑制效果要强于shRNA-1小干扰质粒。功能实验结果显示,与阴性对照组相比,shRNA-2能显著抑制HepG2细胞的增殖、克隆形成及其迁移能力(P均< 0.05)。结论 成功构建了对c-Jun有效shRNA干扰质粒,下调c-Jun的表达能够明显抑制肝癌细胞的增殖和迁移,为进一步研究c-Jun在肝癌中的作用及相关机制提供了工作基础