摘要: 目的 通过将成年比格犬骨髓间充质干细胞( BMSCs)建立体外培养体系,观察及掌握细胞生长形态,运用诱导剂体外定向诱导分化为成骨细胞,为后期建立骨组织工程提供种子细胞。方法 提取成年比格犬的IMISCs,运用半骨髓直接贴驱法进行体外分离与培养。将第2代BMSCs分成2组,实验组用加入等量诱导剂1(地塞米松、B-磷酸甘油钠、L-抗坏血酸)和诱导剂2(骨形态发生蛋白-211 BMP-2)的含胎牛血清培养液进行联合定向成骨诱导培养,对照组只用含血清的培养液进行培养,并于诱导的3、7,14,21天分别行碱性磷酸酶(ALP)活性检测,并于3周后进一步行齿素红染色,ALP染色,4周后行Von-Kossa染色来鉴定诱导分化的成骨细胞。结果 诱导3、7,14,21天,实验组细胞的ALP活性星先增强后减弱的状态,对照组无明显变化。实验组细胞诱导3周后行齿素红染色、ALP染色及诱导4周后行Von-Kossa染色都呈阳性,对照组均为阴性。以上结果均符合成骨细胞的特性,说明实验组有大量成骨细胞生成。结论 体外分离培养的成年比格犬BMSCs在一定诱导剂的作用下可以向成骨细胞定向分化。