摘要: 目的 将小鼠受体酯氨酸激酶EphB2 FN结构域在大肠杆菌细胞中进行表达与纯化,以便于研究与FN结构城相互作用的蛋白质。方法 以重组质粒GV287-EphB2作为模板,经PCR扩增,得到FN结构域的cDNA片段,并将其克隆至pET-28a载体中。将重组质粒pET-28a-FN转化至大肠杆菌BL21 ( DE3 )感受态细胞,经IITG诱导后,利用SDS-PACE检测FN-His,融合蛋白的表达。最后采用Ni-NTA亲和层析法对该蛋白进行纯化。结果本研究成功地构建了FN结构域的原核表达载体。经鉴定,FN-His,融合蛋白能够在大肠杆菌中表达。纯化后,得到少量可溶性FN-His,融合蛋白。结论 小鼠受体酪氨酸激酶EplhB2 FN结构域可以在大肠杆菌中表达非纯化,为研究与FN结构域相互作用的蛋白奠定了实验基础。