摘要: 目的 研究高温条件下小分子热休克蛋白IbpB在大肠杆菌体内的客户蛋白以及在此温度下IbpB对其客户蛋白的作用。方法 构建表达1bpB蛋白的重组质粒pBAD-ibpB,pBAD质粒为对照,转化到BW25113Aibpl菌株。转化pBAD-ibpB质粒的BW25113-AibpB菌株在45℃热处理之后加入甲醛进行交联,亲和层析法对交联产物进行纯化,质谱法对捕获的客户蛋白进行鉴定,过氧化氢酶活性测定和蛋白热聚集体分离的方法检测llpls对其客户蛋白的作用。结果 质谱鉴定结果表明1bpB在高温条件下互相作用的客户蛋白主要是过氧化氢游KatG、色氨蔽降解酶TnaA和延伸因子EF-Tu;在ibpB敲除株中回补IbpB可以减少过氧化氢酶在高温条件下的活性丧失,可以阻止TnaA和EF-Tu在高温条件下发生的热聚集。结论 KalC,TnaA和EF-Tu是1bpB在高温条件下相互作用的主要客户蛋白,IbpB在高温条件下对上述客户蛋白具有明显的保护作用。