摘要: 目的 建立犬肾细胞(Madin-Darby canine kidney, MDCK)缺氧模型,进一步探讨丝裂原活化蛋白激酶( MAPKs)在缺氧性细胞损伤中的活性改变。方法 将MDCK细胞置于体积分数为5%Co2和95%N2的有机玻璃调节性密闭容器中分别培养24、36、48、72、84 h,MTT实验检测细胞的存活力,蛋白免疫印迹法( Westernblot)检测JNK(c-Jun NH2 terminal prolein kinase)和p38 MAPK的磷酸化活性。结果MDCK细胞缺氧24、36、48、72、84 h后,与正常对照组相比,MTT D值均明显下降(P<0.01),MDCK细胞缺氧后,JNK和p38 MAPK的磷酸化水平增高。结论 此方法可以成功建立操作简便、有效的MDCK细胞缺氧模型,且是通过激活JNK,p38MAPK引起缺氧性细胞损伤。