摘要:
目的 探讨E-cadherin对人脂肪干细胞(hADSCs)成表皮分化的影响。方法 利用胶原酶消化法从成人脂肪组织中分离培养hADSCs。携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒载体(Lv-EGFP)介导Ecadherin基因以10,25,50和100的感染复数(MOI)作用72 h转染hADSCs,荧光显微镜下观察荧光强度并统计转染效率。Lv-EGFP-E-cadherin过表达组慢病毒和Lv-EGFP对照组慢病毒分别转染hADSCs,未转染的hADSCs为空白组:4天后RT-PCR检测E-cadheirn mRNA的表达。将各组hADSCs经成表皮诱导14天后,RTPCR检测表皮细胞标志物CK18,Z0-1 mRNA的表达情况。结果 3代以后hADSCs呈均一长梭形,增殖活跃。MOI =10,25,50,100时, EGFP阳性率分别为51.9% ±2.68%,95. 1% ±3.82%,95. 6% ±2. 56%、96.9% ±2.25% ,选择MOI=25为最佳转染滴度进行后续实验。与对照组及空白组相比,转染Lv-EGFP-E-cadherin过表达慢病毒可显著增强hADSCs中E-cadherin mRNA的表达(P<0. 05) ,E-cadherin过表达后可显著增高细胞中CK18,Z0-1 mRNA的表达(P<0.05) ,促进成表皮分化。结论 E-cadherin过表达可在一定程度上促进hADSCs向表皮细胞诱导分化。