兔病毒性出血症3C基因荧光表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

摘要: 目的构建EGFP与3C融合表达的真核表达质粒,为研究RHDV 3C蛋白在病毒感染中的作用提供基础。方法RHDV 3C基因的片段经过反转录成cDNA,纯化的PCR产物经EcoR 1和Sal 1双酶切后克隆到pEGFP-CI载体,构建EGFP与3C融合表达的真核表达质粒。pEGFP-CI-3C真核表达载体转染293T细胞,24后荧光显微镜检测及Western blot检测EGFP-3C融合蛋白表达情况。结果 24 h后荧光显微镜及Western blo检测表明RHDV 3C基因全长编码序能够成功插入到pEGFP-C1载体。结论 EGFP-3C融合表达质粒能够被成功构建,从而有助于探索RHDV 3C蛋白在RHDV感染过程中的功能,为深入探讨RHDV的防治提供基础。