流式细胞术检测小鼠肝脏中嗜酸性粒细胞方法的建立
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摘要: 目的 建立稳定的流式细胞术检测小鼠肝脏组织浸润嗜酸性粒细胞的方法。方法 华支翠吸虫感染4周小鼠及正常小鼠肝脏原位灌注后,制备肝组织单细胞悬液, Procell密度梯度离心获得肝脏白细胞;采用多色流式细胞术,前向角散射( FSC) 、侧向角散射(SSC)及CD45等参数圈门,利用抗Gr-1,Siglec-F等分子的流式抗体对其中的嗜酸性粒细胞进行标记、检测分析。结果 正常肝脏白细胞流式检测显示在前散射中等位置(FScmid)、侧散较高处(ssClbis)有一群细胞,表型多为CD45+ CD3-CD19- ;华支睾吸虫感染后该群细胞比例明显增高,该群细胞不表达MHCI1类分子(MHCI1- ),低表达Grl (Grlo"),表达Siglec F(Siglec F)。结论 流式细胞术检测CD45+ FSCmidsscliGCrlow siglec 细胞是一种稳定的检测及分析肝脏嗜酸性粒细胞数量及功能的方法。