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    突触后致密部蛋白PSD~93与SynGAP相互作用位点的鉴定

    • 摘要: 目的 鉴定突触后致密部蛋白PSD-93与SynGAP结合位点。方法 分别构建PSD-93,SynGAP质粒,免疫印迹检测各个重组质粒是否表达,免疫共沉淀检测PSD-93与SynGAP的结合情况;分别缺失突变PSD-93的95-105aa和170-190na残基以及SynGAP的670-685aa残基,免疫印迹检测各个突变质粒是否表达免疫共沉淀检测两者的结合情况。结果 PSD-93(1-199aa)-HA可在细胞中过表达, PSD-93 (1-109aa)HA不表达或者表达蛋白不稳定;SynGAP的3个质粒均可在细胞内过表达; PSD-93(1-199aa)均可与SynGAP的3个片段相结合。PSD-93(1-199aa)缺失突变95-105aa片段后,可在细胞内过表达,且与SynGAP的3个片段均可结合,而敲除170-190na片段则不能与SynGAP蛋自结合;同样,突变SynGAP(670-685aa)片段则不能与PSD-93蛋白结合。结论 PSD-93与SynGAP结合的位点分别位于PSD-93的170-190aa序列以及SynGAP的670-685aa序列。

       

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