摘要:
目的 研究3种小鼠肿瘤细胞系鼠黏病毒蛋白1(Mxl)基因表达对水泡性口膜炎病毒( vesicular stomatitis virus, VSV)溶瘤效应的敏感性。方法 将本实验室定量后的VSV保种并用来攻击3种不同种类的肿瘤细胞系:RAW264.7(小鼠巨噬细胞白血病),B16(黑色素瘤)、HEPA1-6(小鼠肝癌)细胞系,48 h后通过TCID法和MTT法检测3种肿瘤细胞系对VSV的敏感性。RT-PCR检测VSV感染3种肿瘤细胞系24 h后Mx1基因的诱导表达水平,证实肿瘤细胞系的溶瘤敏感性与Mx1基因表达的关系;应用RNAi技术抑制Mxl基因的表达水平MTT法检测RAW264.7细胞系(最不敏感细胞系)与B16细胞系(最敏感细胞系)溶癌效果的改变。结果用vSV攻击3种肿瘤细胞系呈现出的敏感性依次为B16> HEPA1-6> RAW264.7,通过RT-PCR检测VSV感染3种鼠源肿瘤细胞系Mx1基因的表达水平表明:Mx1基因的表达水平越高,VSV对肿瘤细胞的溶瘤敏感性越低,应用RNAi技术抑制RAW264.7细胞系(最不敏感细胞系)Mx1基因的表达, VSV对该细胞系溶瘤敏感性提高了35%,抑制B16细胞系(最敏感细胞系) Mxl基因的表达,vsV对该细胞系溶瘤的敏感性提高了30%。结论通过RNAi抑制鼠源肿瘤细胞系抗病毒蛋白Mx1基因的表达水平,可促进VSV溶癌的敏感性。