Nod样受体蛋白3(NLRP3)在大鼠原代皮质神经元坏死样凋亡中的表达

摘要: 目的探讨Nod样受体蛋白3 (NLRP3)在大鼠原代皮质神经元坏死样凋亡中的表达情况。方法SD大鼠原代皮质神经元细胞培养12天,Q-VD-Oph预处理30 min后缺糖缺氧刺激诱导坏死样凋亡。将细胞分为正常对照组、缺糖缺氧组(缺糖缺氧2 h,复氧12 h)、实验组(缺糖缺氧2h,复氧3,6、12.24 h,均用Q-VDOph处理), Western blot检测NLRP3蛋白表达,生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)水平;@将细胞分为正常对照组、缺糖缺氧组(缺糖缺氧2 h,复氧12 h)、实验组(缺糖缺氧0.5,1,1.5,2.3 h,复氧12 h,均用Q-VD-Oph处理),再次进行NLRP3及LDH测定;3细胞缺糖缺氧2 h、复氧12 h(用Q-VD-Oph处理)后免疫荧光观察NLRP3的表达。结果缺糖缺氧2h后,随着复氧时间的延长,NLRP3在12h表达量最高,24 h表达量较12h下降(P<0.05) ,LDH在12 h的表达量最高。缺糖缺氧时间不同,各组均复氧12 h时,NLRP3在缺糖缺氧2h表达量最高,3h蛋白表达量较2 h下降(P<0.05) ,LDH在2h的表达址最高。在缺糖缺氧2 h、复氧12 h,细胞免疫荧光强度最高。结论 NLRP3在原代皮质神经元细胞坏死样凋亡中有表达,且随着NLRP3表达盘升高,细胞受损程度相应增高。