摘要: 目的 比较几种小鼠原代胸腺上皮细胞(TEC)分离方法的效果,筛选简单、高效、实用的分离方法。方法将小鼠胸腺组织根据所用的消化分离方法分为以下几组:胶原酶1组(Collagenase I, Col IE组,1 mg/ml),Dispase 11组(Dis I1组, 3 mg/ml)、Col IE +低浓度Dis 11组(Col IE/Dis I1-L组, 0.75 mg/ml)、Col IE+中浓度Dis ll组(Col IE/Dis II-M组, 1.5 mp/ml) ,Col IE +高浓度Dis I1组(Col IE/Dis 11-H组, 3 mg/ml)优选出最适消化方法后,将所得单细胞悬液分成Percoll实验组以及Percoll对照组。采用血细胞计数板进行总组胞数计数,台盼蓝染色法观察细胞的活性;使用流式细胞术检测胸腺基质细胞(TSC)以及TEC的比例。结果与单独使用Dis 11与Col 1E相比,Col 1E与不同浓度Dis 11联合使用均能加快胸腺组织消化(P<0.01),获取单个胸原的总细胞数较多,尤以中、高浓度Dis 1与Col IE联合消化效果更佳(P<0.05或P<0.01)。与单独使用酶消化组相比,Col IE与中、高浓度Disl联合消化均可不同程度地增加获取TSC和TEC的比例(P<0.01)。与Percol对照组相比, Percoll密度梯度离心进一步提高获取TSC和TEC的比例(P<0.05)。此外,各种消化分离方法均可获得高活细胞率的细胞。结论 Col IE与Dis 1I联合消化,结合Percoll密度梯度离心可获取数量多、活性高的小鼠原代TEC