摘要:
目的:探讨白藜三醇(resveratrol,RSV)对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的调控及其相关机制。方法:采用组织块贴壁法体外培养VSMC,细胞分为3组:CON组、FBS组(含20%FBS的培养基)、RSV组。CCK-8法检测血管平滑肌细胞活性以确定RSV最佳作用浓度及时间,qPCR法检测各组细胞内microRNAs的表达水平。为了证实RSV是否通过调控miR-21的表达发挥抗VSMCs增殖作用,除了上述3组,另增加过表达和沉默miR-21组:miR-21 mimics+RSV组、miR-21 inhibitor组、miR-21 mimics组和NC组(miR-21 negative control),免疫蛋白印迹法(Western blot)检测各组PTEN蛋白的表达水平,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测各组细胞周期(cell cycle)明确细胞增殖状况。结果:与CON组相比,FBS组miR-21表达明显上调(P﹤0.05),RSV组miR-21表达明显下调(P﹤0.05)。与CON组相比,FBS组和miR-21 mimics组PTEN蛋白表达量下降(P﹤0.05),而细胞明显增殖(P﹤0.05);RSV组、miR-21 mimics+RSV组和miR-21 inhibitor组PTEN蛋白表达量升高(P﹤0.05),细胞增殖明显抑制(P﹤0.05)。结论:RSV通过抑制miR-21表达而调控其下游靶基因这一途径在大鼠VSMCs中发挥抗增殖作用。 [